Řádek "Už nespí!" má ve hře několik rovin významu. Na jedné úrovni je to prostě Macbethův příkaz celé domácnosti zůstat vzhůru a být ve střehu, protože se bojí, že se něco pokazilo. Linie však nese i hlubší významy a předznamenává události budoucí.
Za prvé, řádek "Už nespí!" lze považovat za metaforu ztráty nevinnosti a začátku Macbethova sestupu do temnoty. Až do tohoto okamžiku hry se Macbeth potýkal se svým svědomím a projevoval lítost nad svými činy. Vyslovením věty „Už nespí!“ však spánek účinně zahání a s ním i jakoukoli šanci na vykoupení. Tato linie představuje zlom v Macbethově charakteru a symbolizuje jeho objetí zla.
Za druhé, řádek "Už nespí!" je mocná kletba, kterou Macbeth vrhá na sebe a celou domácnost. Tím, že Macbeth odpírá sobě i ostatním možnost spát, vytváří stav věčného neklidu a úzkosti. Spánek je často spojován s klidem, obnovou a podvědomím, a tím, že se o něj Macbeth připravuje, připravuje půdu pro mentální a emocionální zmatek, který bude následovat. Fráze tak naznačuje, že nedojde k žádnému oddechu od viny, strachu a paranoie, kterou Macbeth zažívá.
Za třetí, řádek "Už nespí!" předznamenává znepokojivou náměsíčnou epizodu, kterou Lady Macbeth zažije později ve hře. Jak Macbetha stále více pohlcuje jeho vina, Lady Macbeth začíná trpět náměsíčností a nočními můrami, během kterých neustále opakuje větu "Ven, zatracené místo!" (dějství 5, scéna 1). Tato linie v jistém smyslu odráží Macbethův dřívější příkaz a zdůrazňuje nespavost a duševní muka, které pár postihly.
Na závěr věta "Už nespí!" je zásadní moment v Macbeth, který signalizuje Macbethovu proměnu v nelítostného a provinilého jedince. Funguje jako metafora pro ztrátu nevinnosti, mocná kletba a předzvěst budoucích pohrom, které čekají na Macbetha a jeho okolí.