* Předpoklad, že všechny postavy jsou heterosexuální. To je patrné ve způsobu, jakým postavy mluví o lásce a vztazích, a ve způsobu, jakým se vzájemně ovlivňují. Když se například Viola převlékne za muže, okamžitě se předpokládá, že je do Orsina zamilovaná, i když se s ním nikdy nesetkala.
* Zobrazení touhy osob stejného pohlaví jako nepřirozené nebo komické. Nejzřetelněji je to vidět na postavě sira Andrewa Aguecheeka, který si neustále dělá legraci ze své přitažlivosti k mužům. Jeho touhu nikdo nebere vážně a často je za to zesměšňován.
* Skutečnost, že hra končí tradičním heterosexuálním manželstvím. To posiluje myšlenku, že heterosexualita je jedinou přijatelnou formou sexuální orientace.
Vyjádření heteronormativnosti ve Dvanácté noci je problematické, protože marginalizuje a vylučuje neheterosexuální lidi. Vytváří také klima, ve kterém je pro neheterosexuální lidi obtížné otevřeně mluvit o své sexuální orientaci.