Neopětovaná láska je ve hře opakujícím se tématem, protože několik postav je zamilovaných do někoho, kdo jejich náklonnost neopětuje. Viola je například zamilovaná do vévody Orsina, který je zamilovaný do Olivie. Olivia je zase zamilovaná do Cesaria (který je ve skutečnosti Viola v přestrojení). To vytváří složitou síť neopětované lásky, která pohání velkou část akce a humoru hry.
Klíčovým rysem hry je také chybná identita. Viola se převléká za muže jménem Cesario, aby vstoupila do Orsinových služeb. Toto přestrojení vede k řadě nedorozumění a komplikací, protože ostatní postavy si Violu spletou s mužem a zamilují se do ní. Chybná identita také vytváří příležitosti pro Violu pozorovat a komentovat ostatní postavy, což hře dodává na humoru.
Celkově vzato, neopětovaná láska a chybná identita jsou dva klíčové rysy, které přispívají k humoru a složitosti Twelfth Night.