Zpočátku se Mickey Mouse vyznačoval jednoduchou, zakulacenou postavou a velkýma očima. Iwerks přinesl do Mickeyho designu značné zdokonalení a zavedl jemné změny, které posílily jeho osobnost a výraznost. Zvýraznil Mickeyho uši a přidal černé kruhy do očí, čímž postava získala výraznější a roztomilejší vzhled.
Iwerks také hrál klíčovou roli při vývoji raných animací Mickey Mouse. Byl průkopníkem inovativních technik, jako jsou animace „přímo dopředu“ a „pose-to-pose“, které umožňovaly větší plynulost pohybu a dynamičtější zobrazení postavy. Jeho průkopnické příspěvky pomohly vytvořit Mickey Mouse jako milovanou ikonu a celosvětový kulturní fenomén.