Lze ho hrát pouze v 16bitové hře Sonic &Knuckles , která byla vydána jako samostatná kazeta. Poté můžete nasadit kazetu Sonic &Knuckles na kazetu Sonic the Hedgehog 3 a odemknout tak funkci "Zamknutí" , což vám umožní hrát jako Knuckles v nové verzi hry.
Zatímco Knuckles není přímo hratelný v Sonic 3, objevuje se ve hře jako postava šéfa.